樊克浅谈:抗肽抗体的制备实验
提高免疫原性肽的抗血清,是zui简单的方法,获得非隔离的蛋白质的抗体,例如,对来自DNA序列信息的推定蛋白质序列。 这种方法也是有用的,当隔离的抗原是困难或费时,或当抗原是一个大的蛋白家族的成员。
实验步骤:
3. 上样后每0.6 ml 加I为一组分分部收集洗脱液,监测A280并收集一个蛋白峰。
4. 汇集一个峰的洗脱液于15 ml 的玻璃试管中。
5. 将10 μmol 的肽溶于20 mmol/l EDTA中,终浓度约为1 mg/ml。
6. 将其加到装有MBS/BSA复合物的玻璃试管中。
7. 于室温下在,氮气中振摇4 h,于4℃对3 l PBS透析过夜。
8. 换PBS后继续透析4 h。