讲解人ELISA检测试剂盒的正确操作步骤

    人ELISA检测试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗BP180抗体(BP180-Ab)的含量。如血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。今天，我们主要讲解人ELISA检测试剂盒的正确操作步骤：

    1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

    2、设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。

    3、待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL。

    4、随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

    5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

    6、所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

    7、所有孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

    注意事项：人ELISA检测试剂盒在2-8℃，使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用；实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存；浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，zui终结果乘以5才是样本实际浓度；严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。所有液体组分使用前充分摇匀。