胎牛血清给细胞带来的益处

胎牛血清是细胞培养中常用必备的添加培养基。它营养丰富，大约含有三四百种不同成分，具有基础培养基所不具备的营养因子。

它给细胞提供的益处主要有六个方面

1>提供细胞生长所需的天然激素或天然的生长因子。

2>提供天然的结合蛋白，能识别氨基酸、脂质、金属离子和激素等，能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin）即具有上述功能，并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。

又如胎牛血清中富含胎球蛋白（Fetuin），具有多个钙离子结合位点，因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。

3>天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分，促进细胞的附着、铺展。

4>提供解毒功能。这主要通过血清中的某些蛋白与有毒的金属离子结合来完成的。如金属硫蛋白，对多种重金属有高度亲和性，并可清除细胞生长环境中的氧自由基（·O），具有很强的抗氧化活性，可防止细胞衰老。

5>提供酸碱度缓冲的作用，以及维持渗透压。

6>提供蛋白酶抑制剂，使细胞免受蛋白酶的损伤。因此在细胞消化时，常用含血清的培养液终止胰酶对细胞的作用。

由于胎牛血清几乎是通用的生长添加物，适合动物、人和昆虫细胞等许多类型细胞的培养，因此使用血清不需要为每一类细胞优化培养基，节省了大量时间和精力。

血清保存注意事项：

（1）需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

（2）热灭活是指56℃， 30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分（complement）灭活。除非必须，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多，而且还会影响血清的质量。补体参与反应有：细胞毒作用， 平滑肌细胞收缩， 肥大细胞和血小板释放组胺， 增强吞噬作用， 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

（3）瓶装血清解冻需采用逐步解冻法：-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

（4）一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。

（5）血清中的沉淀物 絮状物：主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5分钟去除，也可不用处理。 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，geng换另一批号的血清。

（6）切勿将血清在37℃放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成分会破会而影响血清质