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古朵快讯:缓冲液Tris(77-86-1)与磷酸盐缓冲液之间的对比

发布时间:2023-05-23 阅读:173

  古朵快讯:缓冲液Tris(77-86-1)与磷酸盐缓冲液之间的对比


  Tris和磷酸盐都是很常用的缓冲液,它们有相同的地方也有很多不同的地方,如何能在使用时正确分辨和选择,这也是难倒了一批人。我们今天就先从它们各自的应用及使用环境讲起。让你能很直观的感受到它们的区别。

 Tris缓冲液

  在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定pH值;在凝胶中使用Tris-HCl缓冲体系稳定pH值;被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂;Tris缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成;在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,可用于DNA的稳定和存储;将调节pH值的酸溶液换成乙酸,获得“TAE缓冲液”,换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种缓冲液常用于核酸电泳实验中。

  磷酸盐缓冲液

  一般的有活性的生物制剂都要用磷酸盐缓冲溶液来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整适宜pH值的缓冲作用。蒸馏水不具有盐平衡作用,会破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、有活性的物质不能保证其在适条件下参与生物反应,所以使用PBS是先选。当然,有的生物活性物质需要的条件比较高,就需要在平衡缓冲液中加入多的成分,维持合适的条件保证生物活性物质保持其完整的特性。因此PBS主要用于细胞实验,其缓冲范围适宜在中性(7.0)。

  在生物化学实验中要慎重地选择缓冲溶液,不仅要考虑缓冲液的缓冲范围,还要综合考虑缓冲液的使用环境:

  1. 磷酸盐缓冲溶液的缓冲范围比较宽,但是它在pH7.5以上时缓冲能力很小;Tris本身呈碱性,可以只用Tris-HCl缓冲体系即可配制pH范围由酸性到碱性的缓冲液,方法也较为简单,对于不同的实验,Tris还可以与其他物质组成多种缓冲体系。

  2. 磷酸盐缓冲溶液易与常见的Ca2+离子、Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀,同时会抑制某些生物化学过程以及多数酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脱氢酶等;相比之下Tris缓冲溶液对生物化学过程干扰很小,也不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。若反应体系中存在金属离子或者酶制剂,则以Tris缓冲溶液为较优选择。

  3. Tris缓冲液的pH值受溶液浓度影响较磷酸盐缓冲溶液大,同样稀释十倍,磷酸盐缓冲溶液的pH值变化小于0.1,而Tris缓冲液的pH值变化则大于0.1。因此对于体积变化较大的反应体系,则应慎重使用Tris 缓冲液。

  4. 另外,Tris缓冲溶液受环境影响较大。一般来说,温度每升高一度,pH值下降0.03; 同时其易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。

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