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古朵阐述:猪雌二醇(E2)ELISA试剂盒使用目的

发布时间:2023-05-24 阅读:334

  古朵阐述:猪雌二醇(E2)ELISA试剂盒使用目的

  本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中雌二醇(E2)含量。

  实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪雌二醇(E2)水平。用纯化的猪雌二醇(E2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入雌二醇(E2),再与HRP标记的雌二醇(E2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的雌二醇(E2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪雌二醇(E2)浓度。

  标本要求:标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

  操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

  温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

  配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

  加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

  温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟。

  终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

  猪雌二醇试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针

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