小鼠骨特性碱性磷酸酶ELISA试剂盒操作流程

  小鼠骨特性碱性磷酸酶ELISA试剂盒操作流程：

  (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。

  (2)酶标板置4℃，包被过夜。

  (3)洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后，即甩去)，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。

  (5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。

  (6)洗板，同(4)。

  (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。

  (8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。

  (9)洗板，同(4)。

  (10)每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。

  (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。

  (12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差(W1-W2)，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。(13)数据处理：在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

  小鼠骨特性碱性磷酸酶ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。古朵试剂盒