ELISA实验中样本的收集和运输

     酶联免疫吸附实验（ELISA）可以用于：（1）检测大分子抗原和特异性抗体等；（2）具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。

      ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

ELISA的样本收集与运输：

利用ELISA进行检验常见的样本一般包括血液（指血，静脉血），尿，粪便，脑脊液，胸腹水，前列腺液，**，**分泌物等，这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

ELISA实验中的血清需采用血管收集血液，室温血液自然凝固30分钟，1000xg离心15分钟左右，收集上清，分装后，标好号，-20°C或-80°C保存。运输是用干冰。（注：一个样本检测一个指标至少需要40ul血清，您是一个样本检测4个指标，至少需要160ul血清，多准备一些。）

光镜：肝脏组织4%多聚甲醛固定后密封，4度或者常温保存即可，运输时用冰袋。

电镜：一定要是新鲜的组织加到新鲜配置的2.5%戊二醛中固定后，4度保存，电镜所需的组织块不需要太大，米粒大小即可，运输时用冰袋即可。

免疫组化：取适当的组织放于4%的多聚甲醛中固定，密封，避光，四度或常温保存，运输时加冰袋即可。

RT-PCR和WB：取下肝脏组织，置于-80或者液氮中保存，运输时用泡沫保温盒加干冰。

注意事项:

     血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。

     按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。