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流式检测 T 细胞增殖的技巧有哪些

发布时间:2019-01-10 阅读:24

  集中于 T 细胞的许多基础和临床免疫研究包括增殖测定,都是为了确定 T 细胞是否能够在不同的体外或体内条件下增殖。流式细胞仪术是测量 T 细胞增殖的理想方法,现在有一套染色产品,可以在现有的流式细胞仪染色板中加入增殖染料。与所有流式细胞术染色步骤一样,一定要做一个预实验确定染色试剂的用量和确定采集的细胞数,在下一个 T 细胞实验确定使用其中的一个染色方案来检测细胞的增殖 。

胞内荧光染色: 

   羧基荧光素二乙酸酯琥珀酰亚胺酯(CFSE)或类似的荧光染料是可以进入活细胞内的。在增殖期间,随着细胞分裂荧光染料的浓度也随之稀释,并且可以在流式细胞检测分析时作为离散峰测量多次细胞分裂。当您在预实验中检测这些染料时,需确保这些增殖染料不影响细胞活性或形态。
流式检测T1.jpg

DNA 合成:

  细胞增殖还可以通过胸苷合成类似物 5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU)检测细胞周期 S 期的 DNA 合成量来测定。通常在细胞培养中添加 BrdU 以确定体外增殖,并且使用抗 BrdU 的二抗与细胞内因子结合来测量 BrdU 掺入。
 
流式检测T2.jpg

   以上 T 细胞增殖方法的可能有一种更适合您正在进行的实验,或者可用于您的流式细胞仪。每种方法都相对容易应用到您的下一个实验,并可以根据该检测更好地了解细胞功能。

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