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选购ELISA试剂盒时的相关参考标准

发布时间:2019-02-20 阅读:741

目前,市面上的ELISA试剂盒价格参差不齐,假冒产品众多,我们到底该如何选择呢?以下是上海樊克生物科技小编整理的选购ELISA试剂盒时的相关参考标准,希望能够为新手提供帮助!

一、根据样本可获得性来选择试剂盒
通常而言,商业化试剂盒的样品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供应商的试剂盒对样品的用量要求可少至10ul。如果您的样品很珍贵或较难获取,则需要认真考虑试剂盒对样品用量的要求。如果样品量少,且要做多因子检测时更需谨慎。

二、根据实验物种及待检样品性质来选择
不可轻信能提供近万种试剂盒,覆盖多物种的供应商。但如果又非要检测这些物种的指标时,zui好要对待检物(如有种属差异性)进行同源性分析以及试剂盒的种属交叉反应数据。对于样品类型而言,一般的商业化试剂盒都经过血清、血浆和细胞培养上清液的验证。在选择试剂盒时,zui好要详细阅读说明书,比如血浆样本抗凝剂的使用是否与试剂盒兼容。另外,在某些情形下样品中会存在干扰因素比如溶血血浆、高脂肪含量的样品、人抗鼠抗体(HAMA)、细胞培养上清中含胎牛血清等。因此需根据样品来选择试剂盒,必要时还要根据样本来适当优化。或在样品收集前,zui好先阅读一些可靠供应商试剂盒的说明书或直接咨询。如果您的样品为组织或细胞裂解物,则需要更谨慎的选择试剂盒。市面上大多数的商业化试剂盒没有经过多种来源组织样本的验证。这需要实验君能理解不是所有试剂盒所用的抗体对,都能特异的从一堆裂解物蛋白中特异检出您的目的蛋白,还要考虑组织样品的基质效应(Matrix Effect)等。但如果实验君要了解组织样品的制备问题,我们另起一文来总结。

三、经费预算
说了半天,还是要看经费的预算。没经费咋搞科研呢?公认的知名品牌一般质量可靠,文献引用多。但品牌由于进口和运输等成本较高,因此售价也较高。其实优质国产品牌也是不错的选择, 因省去不少物流和报关费用,与国外进口试剂盒相比价格上有比较大的优惠,而且能提供比较灵活的包装规格, 如48tests小包装,非常适合国情。实验君可以上丁香通、小木虫等行业资讯平台或论坛等了解。

四、认清订购渠道
不论是还是品牌,都需要在订购前先与生产厂商详细沟通产品细节(比如酶标板是否可拆卸),了解售前售后技术服务能力等。然后咨询其订购渠道,比如直接向厂家订购或通过区或省级授权代理商经销商订购。谨防假冒产品,花了钱是小事,实验数据的可靠性、真实性是大事呀,选择正规渠道,选择优质品质!

五、细致比较试剂盒关键性技术参数
ELISA试剂盒的关键技术参数包括板内差异性、板间差异性、批间差异性、重复性、特异性及交叉反应性、回收率等。如果实验君经常开展ELISA实验,建议使用同一厂家的试剂盒,这样可尽量保证数据的重复性(当然前提是实验条件的一致性)。对于科研用的定量ELISA试剂盒,不同的生产厂家使用的抗体对、酶以及底物、生产工艺和研发实力不尽相同,自然不同厂家试剂盒测出的数据会有差异。

六、供应商资质评估
有些供应商可提供数百种常用指标ELISA,然而有些供应商则声称可提供数千种甚至上万种指标的试剂盒,但质量参差不齐,更有滥竽充数祸害科研之辈。那如果选择供应商呢? 一是从同行或实验室同僚了解供应商的口碑,售前售后的处理情况。第二查询供应商的网站详细了解相关指标,可查询这些指标是否已经开发出特异性抗体?如果查遍连抗体都还不可获取,又如何开发出ELISA试剂盒呢? 第三文献引用是王道,尤其是SCI期刊文章对供应商产品的引用。第四了解供应商的研发历史和品牌史,很多供应商频频更换公司名或更换公司注册地,其中名堂实验君应该能悟出。不要迷信国外“品牌”,国外“品牌”不代表是知名品牌。很多打着国外旗号的公司,其实就是空壳的皮包公司,从OEM劣质产品。国外供应商也有售后不给力的时候。

七、根据样品中检测物水平来选择试剂盒
如果实验君对于样品中待检物的水平没有任何可参考的数据,zui好选择宽动力学检测范围的试剂盒。如果样品中待检物的含量很低,建议选择高灵敏度的试剂盒。为了降低基质效应,有必要用稀释液至少做2倍稀释。如果样品中待检物含量远超过试剂盒的检测范围(标曲范围), 也需做适当的倍数稀释。在zui后计算结果时,需乘以相应的稀释倍数。

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