骨髓间充质干细胞如何诱导分化为软骨细胞呢?
骨髓间充质干细胞具有自我更新能力和多向分化的潜能,在特定环境下可以分化为多种组织细胞,其中包括软骨细胞。骨髓间充质干细胞来源广泛、取材方便,可取自健康人或者患者本人,创伤小,且体外分离、培养、扩增操作简单,可作为关节损伤后软骨细胞移植的细胞来源,是生物工程治疗骨关节疾病的基础。
那么,如何将骨髓间充质干细胞诱导分化为软骨细胞呢?
北京协和医院的赵岩等老师建立了稳定的人骨髓间充质干细胞诱导分化为软骨细胞的方法,为后续实验研究提够了稳定的细胞供给。
在实验中,先要找到合适的骨髓间充质干细胞,赵岩等老师购买了美国ScienCell公司的原代的骨髓间充质干细胞(HMSC-bm,货号#7500),并对干细胞表型CD90和CD105的表达进行了鉴定,结果发现,在3-8代之间细胞表型及状态能够维持稳定的骨髓间充质干细胞特征,另外,为排除造血干细胞混杂的可能,老师们还进行了CD34、CD45免疫细胞化学检测,未发现阳性细胞染色,故而可证明此ScienCell的细胞完全为骨髓间充质干细胞来源,可以作为转化为软骨细胞的稳定的细胞来源。
随后,老师们将人的骨髓间充质干细胞通过加入含有TGF β3和FBS的培养基进行三维诱导培养,成功诱导分化了具有软骨细胞形态和软骨功能的细胞。通过此方法诱导得到的细胞,不仅具有软骨细胞形态,还能够产生II型胶原和蛋白多糖这两种关节软骨成分,具有软骨细胞的功能。
综上可知,利用含有TGF β3和FBS的培养基进行三维诱导培养,可以成功的诱导骨髓间充质干细胞,使其转化为软骨细胞,从而为后续的各项研究提供了稳定的细胞来源。
另外Sciencell公司也有配好的间充质干细胞软骨细胞培养基(MCDM,货号#7551),包括500ml基础液、5ml细胞生长因子、5ml双抗,用的时候混匀即可,简单方便,且效果也是非常不错的,大家也可以选择一下。