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ELISA试剂盒配对抗体的办法

发布时间:2019-05-05 阅读:42

ELISA试剂盒单克隆抗体制备时很多朋友会遇到这样的问题,即咱们免疫用的蛋白为原核表达蛋白而意图蛋白是真核蛋白或病毒等,由于没有规范品咱们做出来的抗体没有办法用规范品来验证是否与其发作反响,终究导致咱们做出的是无用抗体。以下内容为我公司试验室技能总结的几种办法供咱们参阅,期望对咱们有所协助。


一、若要检测的抗原为某种新的病毒
ELISA试剂盒办法:1、很多做出该病毒某个蛋白的单克隆抗体;


2、很多收集该病毒疑似感染动物或人血液,用PCR的办法进一步断定每份血液是否真的有该病毒存在;


3、将你做出的很多抗体中的一个做符号作为符号抗体,其他一切抗体作为包被抗体,检测第二步中断定阳性的血清,成果与阴性血清做比照,并画出点状分布图。若阳性血清大部分的点在阴性血清之上祝贺你找到配对抗体了;若成果相差不大,请从头符号一株抗体做相同试验。


二、若要检测抗原为某一细胞因子


ELISA试剂盒办法:1、通过超表达的办法树立安稳表达的细胞系,留意要在意图蛋白上加相应的标签,以便纯化。若仅仅是找到配对抗体则不需求纯化甚至不需求树立安稳表达的细胞系瞬时转染就可完成,若要进一步作出规范曲线请纯化。


2、 将细胞系树立后,咱们就可以拿到规范品了,做配对作业就相应简略。


3、若该种细胞因子可有某种阳性影响物很多影响而来,也可不做细胞系。用阳性影响物影响,咱们细胞影响物的上清液来做规范品也可。

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