ELISA测定试剂盒操作中,这些关键点不容忽视!
1、灌胶前玻板一定要对齐夹紧。曾有过整个下午都在漏胶花胶的惨痛经历。
2、在细胞收集、总蛋白提取整个操作都要尽量在冰上进行。提前开离心机预冷。
3、孵育的时候不要好几张膜叠在一起摩擦摩擦,这对结果也会有影响。
4、用胶片曝光的时候一定要快进快出,胶片可事先折个小角。胶片容易刮花,接触的时候要特别小心,万一划伤了目标条带真是心痛到说不出话。
5、电泳用自来水冲洗干净后,要再用蒸馏水冲洗,晾干。
6、转膜前,膜事先用甲醇激活,转膜时zui好把转膜槽放置在冰浴中进行转膜。
注意:但是用胶片曝光的时间难以捉摸,而且时间过久还可能产生误差,做一次WB超级贵,抗体都舍不得多用,真的错不起。化学发光成像仪就可以解决这个问题,核酸检测、蛋白检测都可搞定。