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显色淡,灵敏度偏低可能原因及解决方法

发布时间:2019-05-29 阅读:104

我们在做实验时,常会遇到elisa试剂盒显色淡灵敏度偏低的问题,以下是根据不同问题可能原因及其防止方法总结,仅供参考。
可能原因及防止方法:
1.孵育反应时间不足
定时钟准确定时
2.洗涤时冲击力太大,洗涤液浸泡时间太长,洗涤次数增加
减少洗涤冲击力,按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数
3.显色剂滴加量不足或顺序颠倒,或混合后加入
滴加显色液时,滴瓶垂直向下,持力均匀,滴速不宜过快,先加显色剂 A,反加显色剂B,不可将A、B液混合后加入
4.显色剂反应时间不足
准确定时
5.蒸馏水水质有问题
测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响
6.试剂盒在运输途中时间太长,温度太高
试剂盒置保温箱内运输,并放足够数量的冰块,尽量缩短运输时间
7.试剂、样品用前未能平衡
用前试剂、样品置室温平衡 30分钟左右。
8.样品和NaN 3 防腐,抑制了酶的反应
样品不能加 NaN 3 防腐
9.试剂盒超过有效期
超过效期试剂盒不要使用
10.试剂开启时间过长长菌
试剂开启后请尽量在短时间内用完
11.移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸头内壁挂液太多或内壁不清洁
校正移液器,吸头要配套,每次装吸头要吻合紧密。移液不宜过快,排放应完全。吸头内壁要清洁,zui好一次性使用。
12.恒温箱温度不足37℃或水浴锅水温度不足37℃)
放入反应板时注意培养箱温度,及时调整,孵育反应期间开启不宜太多,影响温度平衡

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