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鸡ELISA试剂盒试验注意事项有哪些?

发布时间:2019-09-12 阅读:90

   一年有四个时节,每个时节都有不同的风景,而我喜爱秋天的绚丽风景。秋天,枫叶纷飞人们好象来到了一个幽雅恬静的jing界,给人一种凉莹莹的抚慰。全部都在过滤,全部都在提高,连我的心灵也在净化,变得纯真而又夸姣。

在ELISA实验前的注意事项

1、仔细阅读阐明书
2、承认试剂盒在有效期内
3、按阐明书承认全部试剂彻底(数量、体积)
4、标本制备要标准,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存
5、准备好全部实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等
6、依据检测标本数量承认所需试剂的量
7、按阐明书将所用试剂平衡至室温,制造所需试剂
ELISA实验时,注意事项如下:
1.正式实验时,应别离以阳性对照与阴性对照控制实验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,阐明有非特异性反响,可采用羊血清、兔血清或BSA等关闭。
2.在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在运用前均可进行选择:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反响,查询其显色反响是否均一性,据此判明其吸附功用是否杰出。
(2)包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有必定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它实验条件相一起,查询阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。关于大都蛋白质来说一般为1~10μg/ml。

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