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蛋白保存条件受那些因素影响

发布时间:2019-10-14 阅读:65

生物大分子的贮藏保存可分为干态和液态贮藏两种。所以蛋白保存也有干态保存和液态保存两种。但是蛋白保存条件却受多种因素的影响,今天分析的就是影响蛋白保存条件的因素。

蛋白质失活受多种理化因素的影响,主要有空气、温度、水分、光线、酸碱度、样品状态、微生物活动、保存时间和容器等。这些因素可单独起作用,但更多情况是协同作用。那么蛋白保存条件也比如会受到这些方面的影响。下面选择其中几项做详细分析。

1. 空气

  空气的影响主要与潮解、微生物污染及自动氧化等有关。空气中的微生物污染可导致样品腐败变质,吸湿后的样品除潮解变性外也会造成微生物活动的有利环境。某些具有较强还原性的样品,露置于空气中不久便氧化变质,如巯基酶的失活等。某些样品(特别是液体样品或半成品)在空气中的氧化是—种自动氧化过程,是由空气中的氧自发引起的游离基链式反应。自动氧化的机理很复杂.包括氧化、还原、聚合、水解等。氧浓度、水、pH、温度、紫外线等对自动氧化均有影响。

2. 温度

  每种样品均有其稳定的温度范围,温度升高会引起许多物理和化学变化,如温度升高l0℃,氧化反应约加快数倍,酶促反应约增加1—3倍;又如50℃以上蛋白质容易变性等,不利于物质的稳定存在。另外,适宜的温度(如室温)又是微生物污染的重要条件。而低温却可以抑制氧化、水解等化学反应及微生物生长,使微生物处于生命迟缓和隐蔽状态。故大多数生化样品选择低温保存,其稳定性可大大增加。

3.水分

  水分也是影响样品质量的主要因素之一。这里所指的水分,可能来自样品本身,也可能是样品吸湿的结果。水分除直接参与水解、酶解、水合和加成等反应外,还能 加速氧化、聚合、离解和霉变。蛋白质和酶等大分子含水量太高时,会导致高级结构松散,稳定性下降而易于失活。因此,为避开或削弱水的影响,保存固态样品要密闭,液态样品须冻结或加稳定剂。

4.光线

  某些分子可吸收某一波长的光,反射或透过其它光波的光。样品吸光后,使分子活化,内能增加,不利于样品保存。日光中的紫外线能量大,对蛋白质或酶制剂的影响 Z大。在不同条件下,样品对光的敏感性各不相同,受光作用发生变化的程度也不同。

5.酸碱度

  酸碱度对液态样品的保存影响较大。不同样品的稳定pH不同,可由实验求得或从文献资料查得。液体样品保存时,常用缓冲剂控制pH,选择缓冲剂不仅要考虑 缓冲容量的大小,还要注意缓冲剂的种类和浓度对样品稳定性的影响。如青霉素用柠檬酸盐而不用磷酸盐和醋酸盐作缓冲剂,因前者催化其水解的速度小得多。

6.时间

  不同样品均有其不同的有效期限,因此,保存的样品需要作定期检查、处理或更换。

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