ELISA试剂盒开发基本原则之我见

ELISA试剂盒开发基本原则，我认为，开发人员既要充当开发者，也要充当使用者，还要充当评价者。

何为开发？

开发人员zui主要的角色，肯定是试剂盒开发，刚开始一定是以某种通用的试验方案，如通用的缓冲液体系，包括包被工作液，封闭液，酶标记物缓冲液，抗原稀释液等，十几或几十个项目齐头并进，按照现有的套路，一起刷下来，zui后可以肯定的是，只有30%-40%的在这种体系下能够一直进行下去，这还算是比较多的了，而另外的60%-70%项目，会在某些环节卡住，也就是我们说的，实验中碰到的问题，这很正常，因为不同项目特性不一样，结构不一样，这很好理解，因为一般缓冲液里都含有保护剂，如抗原或抗体稀释液里会用到牛血清或牛血清白蛋白，有些项目会与这些保护剂发生交叉反应而使本底增加，抑或是封闭液里的保护蛋白成分，如酪蛋白，卵清蛋白，乳清蛋白，鱼明胶，猪明胶等，尽管这些蛋白对于大部分项目来说，属于“惰性蛋白”，但是还是会存在些项目，会与这些蛋白交叉，所以这些因素都必须充分考虑。

一轮实验下来，那顺利的30%-40%项目，将按照性能评估指导原则、行业标准以及企业标准，进行线性、灵敏度、性、回收率、干扰实验、稳定性等性能评估；剩余60%-70%项目将根据具体情况，分门别类的进行解决，优化，调整，包括但不限于更换保护剂、调整缓冲液、改变操作模式，选用不同方法学，甚至是更换抗原抗体原料，但是每一个原料都有它的特性，不建议zui开始就考虑，要好好珍惜这样的原料，永远要记住，只有在试验中碰到问题，遇到挫折，才能让你进步，才能真的学到东西。

何为使用？

开发者要充当使用者，zui主要的目的就是把自己当作试剂盒的使用者，什么意思呢？简单理解，就是别人买试剂盒干什么，怎么用？这里开发者就是要充当“别人”，只有把自己当作使用者，才能zui大限度了解别人在使用过程中zui希望试剂盒能做什么，能测什么。这样才能更的指导开发，在开发过程中就充分把这些因素考虑进去，比如尽可能将各种类型的样本都测上并找出建议稀释倍数，如血清样本、血浆样本、尿液、唾液、细胞上清等。充分考虑各种情况，对于试剂盒开发肯定是有益的。

何为评价？

试剂盒开发不是单打独斗，一定是一个团体的实验过程，顺利的项目和不顺利的项目，在实验过程中很多方面是可以相互借鉴的，因此，开发人员之间要经常地开组会进行讨论，相互评价，甚至是指出不足，实验室应当是一个充满包容，积采纳意见，积改正，敬畏科学的地方，只要有利于试剂盒开发正向发展，就应当采纳并进行实验验证，目的只有一个，就是开发出更好的试剂盒。

以上是一些关于试剂盒开发的愚见，欢迎批评指正！很多试剂盒开发实验中遇到的问题及解决方案，将在后续以详细的例子展现出来，希望喜欢的朋友可以关注我，相互交流，相互学习，共同进步。

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