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如何把支原体污染赶出你的细胞?

发布时间:2021-04-02 阅读:20

对于已耗费很多时间、大量扩增起来的细胞,或经过基因转染、体外刺激等大量工作处理过的细胞,如果发现细胞被支原体污染了,怎么办?古朵生物为您分析如何有效把支原体污染赶出你的细胞!

由于前期工作量巨大,我们无法丢弃已有细胞。但由于价格原因,又无法使用那些昂贵试剂杀除细胞上的支原体,同时,实验人员还需要清除细胞上的支原体污染,让实验得以往下推进,以蕞终获得准确的实验数据。

实验者可选用对支原体特-效的抑制剂,通过对细胞的前期处理,中期加药,逐步通过4代左右的培养,从而将支原体污染彻底清除,确保试验顺利推进,结果准确。

支原体污染对细胞培养造成多方面的不良影响,已经成为在细胞培养时的一个严重问题,保守估计常规细胞培养中支原体污染率为15-35%,严重干扰实验结果的可信度。因此,定期进行支原体检测和去除,确保无支原体存在细胞培养体系内才能获得准确有效的实验数据。



什么是支原体(Mycoplasma)

支原体又称霉形体,直径在0.1-0.3μm,是目前发现的蕞小的蕞简单的原核生物,可以轻松地通过滤膜,混入培养系统中,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分支状等多种形态。通常依附在细胞膜表面,支原体没有刚性的细胞壁,因此普通的抗生素对它根本不起作用,实验室常见的种类有:口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体、发酵支原体、人型支原体、唾液支原体、肺支原体和梨支原体等。

支原体污染的后果

细菌和真菌造成的污染相对比较容易检测、预防和去除,然而支原体造成的污染很难察觉,即使生长密度高达 107-109CFU/ml,也很难有污染迹象(浑浊、pH 变化等)。支原体污染后导致细胞生长变慢,状态变差,不会马上使细胞致死,但会影响细胞内的各种参数,如改变细胞膜抗原性,改变细胞新陈代谢,干扰核酸的合成,改变 DNA 转染效率,导致染色体畸变等。

典型的支原体污染来源

①细胞之间交叉污染; ④培养基或其他试剂污染;

②工作环境或实验器材的污染; ⑤制备细胞的原始组织或器官的污染;

③实验者无菌操作不

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