如何选择二抗

什么是二抗？

二抗是指用于靶向结合一抗的抗体。在多种免疫印迹、ELISA以及免疫荧光等免疫实验中，二抗经常和一抗结合使用以检测目标蛋白。很多二抗都带有标记物，例如Alexa Fluor荧光染料或辣根过氧化物酶（HRP），从而使二抗的信号可以被检测到。

实验中也可以使用带有标记物的一抗，但是二抗有很多优点。无论是使用哪种一抗进行检测，使用二抗可便于换不同的标记物。例如，同样的一抗可以与HRP标记二抗一起用于免疫印迹，也可以与另一种Alexa Fluor 488荧光标记二抗一起用于免疫荧光实验。

另外，二抗结合在抗原位置的标记染料比直标一抗要多，从而增强检测信号。使用二抗可以避免对一抗进行复杂且昂贵的化学标记（偶联），而且偶联反应（具有氨基酸特异性）可能干扰一抗对抗原的识别。

选择合适的二抗

要选择出一种适用于您的应用和研究的佳二抗，建议考虑以下因素：

• 种属来源和种属反应性
• 特异性反应
• 纯化方法
• 交叉吸附
• 多重检测能力
• 抗体类型和亚型
• 完整抗体还是抗体片段
• 标记物
• 生物素结合蛋白