RNA电泳如何得出漂亮的条带？
方法:
1.电泳槽,制胶器,梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——>自来水冲洗干净——>ddH20 冲洗——>3%H2O2 灌满浸泡过夜——>灭活的 0.1%DEPC水冲洗干净——>超净台内紫外线照射过夜.
2.烧瓶,烧杯,药匙,量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC 水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干.或者 ddH20 清洗干净, 超净台内紫外线照射过夜.
3.电泳缓冲液必须是 RNase free.
4.预电泳 5-10min 减少了非特异 RNA 条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电泳仪装置是否有误.
5.样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样时 RNA 的扩散,加样后 RNA 从齿槽逸出造成 RNA 的弥散及定位不良等现象.
6.电泳 3-5min 让 RNA 进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的 RNA 量及定位的准确性,从而有利于 DNA 的鉴定和纯化.
1.电泳槽,制胶器,梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——>自来水冲洗干净——>ddH20 冲洗——>3%H2O2 灌满浸泡过夜——>灭活的 0.1%DEPC水冲洗干净——>超净台内紫外线照射过夜.
2.烧瓶,烧杯,药匙,量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC 水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干.或者 ddH20 清洗干净, 超净台内紫外线照射过夜.
3.电泳缓冲液必须是 RNase free.
4.预电泳 5-10min 减少了非特异 RNA 条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电泳仪装置是否有误.
5.样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样时 RNA 的扩散,加样后 RNA 从齿槽逸出造成 RNA 的弥散及定位不良等现象.
6.电泳 3-5min 让 RNA 进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的 RNA 量及定位的准确性,从而有利于 DNA 的鉴定和纯化.
