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古朵常见问题解答:多重免疫荧光染色实验

发布时间:2022-11-10 阅读:79

  问:样本可以做成冰冻切片吗?

  答 可以的。抗原修复步骤不推荐用加热的方法,推荐用抗体洗脱液

  问 所有操作要避光吗?

  答 不需要,在常规环境下操作就可以,染料的荧光强度很高。

  问 抗体修复液每一轮修复都要换吗?

  答 是的,每一轮都要根据抗体选择相应的修复液。

  问 染料的选择会影响后染色吗,有共定位的话怎么办?

  答 共定位的情况,我们可以通过单一通道观察来好的检测各指标的分布情况,染料不会对染色有影响,串色的情况需要预实验做充足,包括抗体稀释比例,染料与放大液比例,修复条件的确定。

  问 多色用的一二抗各是什么种属?

  答 多色的优势在于一二抗种属无需特别要求,一抗根据样本种属选择既可,二抗根据一抗选择即可,多个抗体组合,种属不会有影响。

  问 抗体洗脱和微波修复哪种方式洗脱?

  答 微波修复洗脱稳定,抗体洗脱液对大多数抗体都管用,难洗的抗体延长洗脱时间就可以啦!

  问 实验用时真的一天能做完吗?

  答 相比普通的组织荧光实验,我们一抗的孵育时间只需室温30min,二抗和信号放大步骤只需孵育10min,能大大节约时间,五色左右可在一天内做完。

  问 多色样本的寄送有条件限制吗?

  答 正常的石蜡切片和组织芯片很稳定,只要防震盒常温运输即可,冰冻切片的话,需要干冰低温运输。

  问 我的组织还有GFP蛋白,给结果的时候能排除干扰吗?

  答 可以的,结果分析的时候可以避免绿色通道,分析软件赋予的颜色是伪彩色,可以换其他颜色。

  问 我这边提供抗体的话,抗体需要满足什么条件吗?

  答 抗体起码要满足IHC/IF的实验应用,各品牌供应商都会提供相应的实验验证的,我司组化抗体经过严格实验验证,是不错的选择。

  问 如果我能提供抗体给你们做服务的话,需要的抗体量是多少?

  答 需要的抗体量要根据样本数来,但一般来讲,50-100ul的抗体足够完成预实验+正式实验了。问 在指标与染料的搭配以及染色顺序上,有什么规律吗?

  答 并没有一个特别的线性关系,和蛋白的种类、表达量以及修复条件都有关系,所以会多因素考虑,多尝试,预实验很重要。

  问 TSA技术原理中有抗体洗脱的步骤,但是在你们的试剂盒步骤说明中却没有?

  答 试剂盒步骤中的抗原修复过程就是抗体洗脱过程。

  问 B细胞、T细胞、DC细胞常用maker能推荐下吗?

  答

  T细胞:CD3、CD4、CD8、FoxP3(再细化还有:GranzymeB、PD-1、TIM-3、CD45)

  B细胞:CD19 ;

  DC细胞:CD8α、CD11b

  多重免疫荧光染色实验  上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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