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牛血清使用所产生的问题,如何合理热灭活?

发布时间:2022-11-25 阅读:194

  牛血清使用所产生的问题,如何合理热灭活?


  由于牛血清营养丰富,贮存条件特殊,因此在贮存和使用过程中容易产生以下问题:

  1、改变培养液的pH值

  牛血清的pH理论值为7.0~8.0,培养基在加入规定量的碳酸氢钠后(即达到细胞生长所需要的渗透压),再加入10%的牛血清,一般会使培养液的pH值发生改变。因此在使用过程中应注意pH的变化,如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl调pH到所需值。

  2、由于血清的营养成分丰富,非常适合细菌、真菌和支原体等生长,所以血清很容易受到污染。

  3、血清在贮存解冻过程中会产生沉淀,这是由于血清中含有大量脂蛋白、纤维蛋白及多肽类物质,在-15℃冷冻保存解冻后就会自然形成沉淀,随着保存时间的延长,沉淀量会增加。因此在融化血清时一般应先在4℃放置使之解冻,然后放在室温使血清完全融化,以避免沉淀的增加。添加血清时应避免把沉淀加入培养液,否则由于沉淀的存在会使得所培养的细胞产生大量黑点,或者细胞表面将会覆盖一层油状物质,影响细胞的正常生长。为减少血清的损失,可以把有沉淀的血清收集起来进行离心处理,将上清液加入培养液使用。

  如何合理热灭活

  必须要灭活,根据血清厂家多年来总结的经验,常规解冻后,40℃水浴加热20分钟即可,能够大程度地保留营养成分。

  另外,还有三个细节需要注意:

  1、将血清用三步法彻底解冻后再进行热灭活。

  2、为尽可能减轻热灭活对血清品质的影响,一次灭活的血清体积不宜过大。

  3、温度需有对照

  好准备同样的容器装相等体积的水(初始温度与血清相同温度),灭活时将装有血清和水的容器同时放入40℃水浴,在装水的容器中放置温度计,加热过程中不时地轻轻旋转混匀血清,当温度计显示达到40℃左右,开始计时。

  胎牛血清注意事项:

  水面没过血清液面且管底不接触水浴锅底面。

  温度计需时不时晃动,且不接触管壁。

  初始温度应相同。

  两容器材质相同。

  液体体积相同。

  装水容器口用封口膜或保鲜膜封住,只露出温度计即可。

  牛血清 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。

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