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细菌简单染色实验方法@古朵新闻

发布时间:2022-12-28 阅读:209

  简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此法操作简便,适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。

  古朵详述实验方法原理:

  常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下易于识别,常用作简单染色的染料有:美蓝、结晶紫、碱性复红等。

  当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时,细菌所带正电荷增加,此时可用伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料染色。

  实验材料:

  枯草芽孢杆菌(12-18 h营养琼脂斜面培养物)藤黄微球菌(约24 h营养琼脂斜面培养物)

  试剂、试剂盒:

  吕氏碱性美蓝染液/草酸按结晶紫染液齐氏石-炭酸复红染液

  仪器、耗材:

  显微镜酒精灯载玻片接种环双层瓶(内装香柏油和二甲-苯)擦镜纸生-理盐水

  实验步骤:

  1.涂片

  取两块载玻片,各滴一小滴(或用接种环挑取1~2环)生-理盐水(或蒸馏水)于玻片中央,用接环以无菌操作(图IV-1)分别从枯草芽泡杆菌和藤黄微球菌斜面上挑取少许菌苔于水滴中,混匀井涂成薄膜。若用菌悬液(或液体培养物)涂片可用接种环挑取2~3环直接涂于载玻片上。

  2.干燥

  室温自然干燥。

  3.固定

  涂面朝上,通过火焰2~3次。

  此操作过程称热固定,其目的是使细胞质凝固,以固定细胞形态。并使之牢固附着在载玻片上。

  4.染色

  将玻片平放于玻片搁架上,滴加染液于涂片上(染液刚好覆盖涂片薄膜为宜)。吕氏碱性美蓝染色1~2 min,石-炭酸复红(或草酸铵结晶紫)染色约1 min。

  5.水洗

  倒去染液。用自来水冲洗,直至涂片上流下的水无色为止。

  6.干燥

  自然干燥,或用电吹风吹干,也可用吸水纸吸干。

  7.镜检

  涂片干后镜检。

  注意事项:

  1.载玻片要洁净无油斑,滴生-理盐水和取菌不宜过多,涂片要涂抹均匀。不宜过厚。

  2.热固定温度不宜过高(以玻片背面不烫手为宜),否剿会改变甚至破坏细胞形态。

  3.水洗时不要直接冲洗涂面,而应使水从载玻片的一端流下。水流不宜过急、过大,以免涂片薄膜脱落。

  4.涂片必须完全干燥后才能用油镜观察。

  细菌简单染色实验方法上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针

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