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细胞因子ELISA试剂盒在处理和保存方面需考虑那些问题

发布时间:2023-01-10 阅读:59

  细胞因子ELISA试剂盒在处理和保存方面需考虑那些问题


  一、血清标本如是以无菌操作别离,则能够在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则主张冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。

  二、标本在保存中如呈现细菌污染所形成的的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。

  三、要注意防止呈现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有相似过氧化物的活性,因此,在以HRP为符号酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,然后与后面加入的HRP底物反响显色。

  四、冰冻保存的血清标本须注意防止因停电等形成的重复冻融。标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生破坏效果,然后引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振动,重复倒置混匀即可。

  五、细胞因子ELISA试剂盒,样本的采集及血清别离中要注意尽量防止细菌污染,一则细菌的成长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白发生分化效果;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作符号的测定办法发生非特异性干扰。

  ELISA检测试剂盒有哪些免疫测定:

  ELISA检测试剂盒中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不行溅起,不行发作气泡。

  加标本一般用微量加样器,按规则的量参加板孔中。每次加标本应换吸嘴,避免发作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法 ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规则的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中参加稀释液,再在其中参加血清标本,然后在微型震动器上震动1分钟以保 证混和。加酶结合物使用液和底物使用液时可用定量多道加液器,使加液进程迅速完结。

  在ELISA检测试剂盒中一般有两次抗原抗体反响,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反响的完结需要有一定的温度和时刻,这一保温进程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。

  ELISA属固相,抗原、抗体的结合只在固相表面上发作。以抗体包被的夹心法为例,参加板孔中的标本,其中的抗原并不是都有平等的和固相抗结合的时机,只要贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体触摸。这是一个逐渐平衡的进程,因而需经分散,才干到达反响的结尾。在这以后参加的酶符号抗体与固相抗原的结合也同样如此。这便是为什么ELISA反响总是需要一定时刻的温育。

  温育常采用的温度有43℃、37℃、室温文4℃(冰箱温度)等。37℃是试验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的适宜温度。在建立ELISA方法作反响动力学研究时,试验表明,两次抗原抗体反响一般在37℃经1-2小时,ELISA检测试剂盒产物的生成可达高峰。为加速反响,可进步反响的温度。

  有些试验在43℃进行,但不宜采用高的温度。抗原抗体反响4℃为*,在放射免疫测定中多使反响在冰箱中,以构成多的沉积。但因所需时刻太长,在ELISA中一般不予采用。

  ELISA试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。

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