古朵生物| 三组织切片染色操作步骤

  古朵生物| 三组织切片染色操作步骤

  1、Giemsa工作液的配制： 按试剂(A): 试剂(B) =1:9配制Giemsa stain工作液，即取1份的Giemsa stain储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中，充分混匀，即为Giemsa stain工作液。配制后的Giemsa stain工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。

  2、新鲜组织立即置于Regaud固定液固定2天，期间应换1次固定液。

  3、3%的重铬酸jia固定1天。

  4、流水冲洗16个小时或过夜。

  5、按照常规脱水、包埋。

  6、切片，厚度约为5μm。

  7、常规脱蜡至水。

  8、蒸馏水清洗2次，每次约1min。

  9、置于含有Giemsa stain工作液的染缸内，浸染18～24h。

  10、蒸馏水稍微清洗。

  11、0.1～0.5%的乙酸洗1～2min。

  12、自来水稍微冲洗。

  13、用无水乙醇迅速脱水3次，每次5～10s。

  14、二jia苯透明。

  15、中性树脂封固。

  染色结果：

  细胞核蓝色至紫色

  细胞质淡蓝色

  嗜铬细胞胞质黄绿色

  结缔组织淡红色

  注意事项：

  1、 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色结果。

  2、 涂片染色中Giemsa染色后，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。

  3、 如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液的浓度。

  4、 Giemsa涂片染色和组织切片染色中，pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁无酸 碱污染以免影响染色结果。

  5、染色液在稀释后液面应有金属光泽，表示染液有染色作用，否则染色液可能失效。 6、 Giemsa组织切片染色中，染色后需用大量0.1～0.5%的乙酸急速冲洗，避免浮面 沉淀 物污染切片后难以洗脱。

  7、0.1～0.5%的冰乙酸分化，常用于Giemsa组织切片染色，如有必要亦可用于细胞涂片，但其浓度应适量下调。0.5%的冰乙酸分化切片时，切片呈粉红色即可终止。

  8、Giemsa组织切片染色中，无水乙醇脱水要迅速，否则切片易褪色。

  9、Giemsa涂片染色和组织切片染色中，如需急速获得结果，可以按Giemsa stain储存液：磷酸盐缓冲液(1×) =1：1配制，即取吉姆萨储存液(10×)1份、磷酸盐缓冲液(1×)1份，充分混匀，即为快速吉姆萨染色工作液，将染色液滴加于细胞涂片或组织切片上，加热染色，20～30s后重新加染色液，反复5～10次，其余步骤同上。

  10、染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。

  11、Regaud固定液：按3%重铬酸jia水溶液：甲醛=4:1配制，临用前混匀，1～2天后失效。

  12、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 13、使用场所应通风，并远离火源。

  有效期： 24个月有效甲基绿。

  三组织切片染色操作步骤 古朵既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生 化试剂，标准物质、天然植物提取物及中药标准品，核酸、酶、缓冲剂、显色底物，医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。 品种类超过2万种，广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。