古朵生物：hepes缓冲液配制详细介绍

  古朵生物：hepes缓冲液配制详细介绍

  缓冲液不论是在有机化学还是无机化学中，其地位都是“尊贵”的。因为在许多实验操作中进行反应都必须要求酸碱性保持在一个合理且稳定的范围内，而这些条件的实现就需要通过加入一定量的缓冲液才能达到。除了Tris、Tris-hcl、Caps等是多见的缓冲液，另外还有PB、PBS以及MOPS缓冲液也是常用类型，那么这些缓冲液该如何配制呢?下面古朵生物技术给大家介绍一下。

  在日常实验操作过程中使用较为频繁的就是缓冲液，但因其类型较多，像常见的有：磷酸盐、硼酸盐、Tris、HEPES等溶液，通常会根据实验要求来进行选择。这主要是因为缓冲液的选择错误会造成实验结果的偏差，如使用pH值相同的类型溶液，但因为某种离子导致沉淀现象，就可能使实验产生不需要的化学反应，影响实验操作。由于hepes溶液近期使用操作误区较多，所以下面就详细给大家介绍一下它。

  作为一种非离子型的两性溶液，其pH值在7.2-7.4之间，是大多数实验中的选择溶液，例如用于生化诊断试剂盒和细胞培养液中。尤其是在开放式细胞培养中它可以较为稳定的维持pH值，并对细胞性作用。

  具体的配比详解如下：

  1、以配制500毫升的HEPES，PH等于7的储备溶液为例。首先准备119g的粉末溶解到400毫升的去离子水中，然后加入0.5-1M的氢氧化钠溶液，将其调节至所需要的pH值，再加入去离子水定容，在4度条件下保存即可。

  2、如果是要在HEPES中加入少量盐，以500毫升为例，其配比方法为准备HEPES溶液6.5g,氯化钠8g,磷酸氢二钠七水合物0.19g,然后使用0.5M的氢氧化钠溶液调节pH值，进行定容。

  3、如果是2×HEPES缓冲盐溶液的配制，需按照氯化钠1.6g,氯化钾0.074g，磷酸氢二钠二水合物0.027g和1g的HEPES充分溶解至90毫升的去离子水中，然后用0.5M氢氧化钠溶液调节至所需pH值，再用蒸馏水定容即可。

  4、100 x HEPES贮存液配比为取23g的HEPES溶于90ml双蒸水中，然后添加1M氢氧化钠溶液调节pH值到7.5-8.0，加去离子水定容至100ml，过滤除菌，在4℃或-20℃保存下保存即可。

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