古朵新闻：蛋白含量的测定—考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒

  古朵新闻：蛋白含量的测定—考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒

  原理

  蛋白质分子具有-NH3+基团，当棕红色的考马斯亮蓝显色剂加入蛋白标准液或样品中时，考马斯亮蓝染料上的阴离子和蛋白-NH3+结合，使溶液变为蓝色，通过测定吸光度可计算出蛋白含量。

  试剂的配制

  1、考马斯亮蓝贮备液 60×1瓶。临用时按照所需量用蒸馏水1:4稀释(即5倍稀释)，配成应用液，4℃贮存。

  2、蛋白标准液 0.615g/L蛋白标准液1ml×1支，4℃贮存。

  3、配制2%组织匀浆。

  操作

  1、样本前处理 ①配制2%组织匀浆称取待测组织的重量，按重量体积比加生理盐水制备成10%的组织匀浆，1000-3000r/min，离心10min(根据所测指示不一样，则所需转速不一样)，然后取组织匀浆上清再用生理盐水按1:9稀释成1%组织匀浆，或用生理盐水按1:4稀释成2%的组织匀浆待测。②血清可用生理盐水按血清：生理盐水1:49稀释，待测。

  总的来说，测定范围为1g/L(mg/ml)左右为宜，请在批量测试前先做1~2个样本的预试。

  2、按表操作

  蛋白含量操作步骤

  试剂

  空白管

  标准管

  测定管

  DDH2O(ml)0.05

  1g/L标准液(ml)—0.05—

  样品(ml)——0.05

  考马斯蓝显色剂(ml)3.03.03.0

  混匀后静置10min，于595nm波长处比色(1cm光径比色杯)，用空白管调零，测定各管的吸光度。

  3、蛋白含量的计算

  蛋白含量(g/L)=(测定管吸光度-空白管吸光度)/(标准管吸光度-空白管吸光度)×标准管浓度(g/L)

  考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。