小鼠白细胞介素17(IL-17)试剂盒操作步骤

  小鼠白细胞介素17(IL-17)试剂盒操作步骤

  1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

  120pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

  60pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

  30pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

  15pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

  7.5pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

  2. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

  3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

  4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

  5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

  6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

  7. 温育：操作同3。

  8. 洗涤：操作同5。

  9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

  10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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