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仓鼠E选择素酶联免疫试剂盒操作步骤

发布时间:2023-09-15 阅读:176

  仓鼠E选择素酶联免疫试剂盒操作步骤

  仓鼠E选择素酶联免疫试剂盒 试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中SELE 表达。用纯化的SELE 抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中SELE 相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的SELE 抗体结合,形成抗体 抗原 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与 CUTOFF 值相比较,从而判定标本中SELE 的存在与否。

  操作步骤:

  1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

  2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50%l。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40%l,然后再加待测样品 10%l。加样将样品加 于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

  3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

  4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

  5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

  6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50%l,空白孔除外。

  7. 温育:操作同 3。

  8. 洗涤:操作同 5。

  9. 显色:每孔先加入显色剂 A50%l,再加入显色剂 B50%l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液 50%l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

  仓鼠E选择素酶联免疫试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。

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