48t/96t 巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)试剂盒
简单介绍
48t/96t 巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)试剂盒的详细介绍
中文名:人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒
别名:人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA kit
供应商:上海古朵
规格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6个月
库存状态:现货供应
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本
注:本产品仅供科研使用
运输方式:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。
人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)试剂盒 实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶-13(MMP-13)水平。用纯化的人基质金属蛋白酶-13(MMP-13)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入基质金属蛋白酶-13(MMP-13),再与HRP标记的基质金属蛋白酶-13(MMP-13)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-13(MMP-13)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-13(MMP-13)浓度。
人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)试剂盒 试剂盒组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(640μg/L) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)试剂盒 操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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