48t/96t 人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒
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产品名称：48t/96t 人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒
产品型号：48t/96t
产品厂商：上海古朵生物科技有限公司
简单介绍
人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒操作步骤，产品用途：用于测定血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
48t/96t 人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒的详细介绍
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中文名：人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒
英文名称：Human Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA KIT
供应商：上海古朵
规格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6个月
使用范围：仅供科研使用，不得用于临床。
产品用途：用于测定血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒操作步骤 ：
1、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50?l，待测样品孔中先加样品稀释液40?l，然后再加待测样品10?l（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2、温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶标试剂50?l，空白孔除外。
6、显色：每孔先加入显色剂A50?l，再加入显色剂B50?l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
7、终止：每孔加终止液50，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
◆可逆性：
抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：
Ag+Ab→Ag·Ab
抗体的亲和力（affinity）是抗原抗体间的固有结合力，可以用平衡常数K表示：
K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]
◆适比例：
在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物（沉淀）的量。曲线的高峰部分是抗原抗体比例合适的范围，称为等价带。在等价带前后分别为抗体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗体度过剩，则无沉淀物形成，在免疫测定中称为带现象。抗体过量称为前带，抗原地过量称为后带。在用免疫学方法测定抗原时，应使反应系统中有足够的抗体量，否则测得的量会小于实际含量，甚至出现假阴性。
人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒操作步骤 注意事项：
1,封闭中的蛋白会非特异性将ELISA板子中没有结合包被物的位点封闭掉,这样之后加入的抗原或者抗体就不会再和板子发生非特异性的结合.使ELISA的结果更加的准确品
2，固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
3，包被抗体的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，蛋白质包被的适浓度需进行滴定然后观察阳性标本的OD值。
4，酶标记抗体工作浓度的选择：先用直接ELISA法进行初步效价的滴定，然后再固定其它条件，后在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
5， ELISA试剂盒酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，如 TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。
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规格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6个月
使用范围：仅供科研使用，不得用于临床。
产品用途：用于测定血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒操作步骤 ：
1、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50?l，待测样品孔中先加样品稀释液40?l，然后再加待测样品10?l（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2、温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶标试剂50?l，空白孔除外。
6、显色：每孔先加入显色剂A50?l，再加入显色剂B50?l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
7、终止：每孔加终止液50，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
◆可逆性：
抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：
Ag+Ab→Ag·Ab
抗体的亲和力（affinity）是抗原抗体间的固有结合力，可以用平衡常数K表示：
K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]
◆适比例：
在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物（沉淀）的量。曲线的高峰部分是抗原抗体比例合适的范围，称为等价带。在等价带前后分别为抗体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗体度过剩，则无沉淀物形成，在免疫测定中称为带现象。抗体过量称为前带，抗原地过量称为后带。在用免疫学方法测定抗原时，应使反应系统中有足够的抗体量，否则测得的量会小于实际含量，甚至出现假阴性。
人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒操作步骤 注意事项：
1,封闭中的蛋白会非特异性将ELISA板子中没有结合包被物的位点封闭掉,这样之后加入的抗原或者抗体就不会再和板子发生非特异性的结合.使ELISA的结果更加的准确品
2，固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
3，包被抗体的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，蛋白质包被的适浓度需进行滴定然后观察阳性标本的OD值。
4，酶标记抗体工作浓度的选择：先用直接ELISA法进行初步效价的滴定，然后再固定其它条件，后在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
5， ELISA试剂盒酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，如 TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。
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