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48t/96t 人乙型肝炎病毒前S2抗原ELISA试剂盒操作步骤
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48t/96t 人乙型肝炎病毒前S2抗原ELISA试剂盒操作步骤

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产品名称:48t/96t 人乙型肝炎病毒前S2抗原ELISA试剂盒操作步骤

产品型号:48t/96t

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简单介绍

人乙型肝炎病毒前S2抗原ELISA试剂盒操作步骤,适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床

48t/96t 人乙型肝炎病毒前S2抗原ELISA试剂盒操作步骤的详细介绍

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中文名:人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA试剂盒
英文名:human hepatitis B virus,HBV preS2Ag ELISA Kit
供应商:上海古朵
规格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床



人乙型肝炎病毒前S2抗原ELISA试剂盒操作步骤 检测原理:
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBV preS2Ab)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBV preS2Ab)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBV preS2Ab)含量。




注意事项:
⑴ 严格按照人脂蛋白脂酶(LPL)elisa试剂盒说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
⑵ 加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
(3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。
(4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
(5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
(7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
(8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
(9)应保证C清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至zui低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。



人乙型肝炎病毒前S2抗原ELISA试剂盒操作步骤 操作步骤:
1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。
4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。
7、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
8、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s),37℃避光显色15min。
10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。
12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

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