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48t/96t 人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)试剂盒
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48t/96t 人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)试剂盒

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产品名称:48t/96t 人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)试剂盒

产品型号:48t/96t

产品厂商:上海古朵生物科技有限公司

简单介绍

人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)试剂盒,样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

48t/96t 人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)试剂盒的详细介绍

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中文名:人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)ELISA试剂盒

英文名:Human Pulmonary surfatcant-associated protein C,SP-C ELISA Kit

供应商:上海古朵

规格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6个月

样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。

用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

运输方式:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。

检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。




人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)试剂盒  血浆样本直接测定前处理方法:

(1)加酶抑制剂:准确采全血若干毫升,注入预冷的加有抗凝剂的塑料指形管中,迅速低温离心,取血浆低温保存待测。抑肽酶有液体的与固体的。固体的抑肽酶可用生理盐水溶解。

(2)酸化处理:每毫升血浆加1mol/l HCl 0.2ml,低温保存待测。以上两种方法,任选一种即可。

血浆样本的间接测定 血标本经提取后,可去除蛋白质等干扰因素,并使微量的生物活性肽浓缩,但较费时,成本也高。常用的提取方法有:

(1)柱层析提取法:有多种层析柱可供提取不同的神经肽,其中较为方便的是用Sep-pak C18层析柱提取。主要步骤:

①柱的预处理:该柱有两头,长头连接注射器,可注入溶液与样品,短头为排出口。预处理时注入乙腈10ml。蒸馏水20ml,使柱中的生物胶活化。

②注入样品(如血浆、脑脊液、腹水、尿等):样品中的水份流出,生物活性肽、蛋白及杂质等吸附在生物胶上。血浆上柱前,如先去除蛋白,可增加柱子的使用时间。

③淋洗:用4%HAC溶液100ml注入柱中,以洗去一些杂质。

④洗脱:用7ml酸性乙腈作为洗脱剂,注入柱中,把生物活性肽洗脱下来,收集在塑料指形管中。

⑤清洗:用乙腈、蒸馏水清洗柱子,以备后用。

⑥将洗脱液吹干,低温保存待测。测定时可加入一定量的缓冲液溶解。

人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)试剂盒  操作步骤:

1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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