大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA检测试剂盒
简单介绍
大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA检测试剂盒的详细介绍
中文名:大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA检测试剂盒
保存:2~8℃
有效期:6个月
样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
运输方式:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。
检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
1、试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻;
2、加样中可能遇到的问题:在做血清或是血浆用于检测试剂的时候,会碰到血清血浆不好分离的情况,这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时,然后在进行离心处理;
3、洗板时容易造成误差: 因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动;
4、显色问题: 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长,都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候,要先查看显色剂本身的情况;
5、终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,差生气泡,造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒;
6、读板:读板的时候先应该保证板的清洁干净;
7、严格按照说明书操作。
大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA检测试剂盒 ELISA 试剂盒 17 个相关操作技巧如下:
1. 切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
2. 合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
3. 在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
4. 务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的度
5. 样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。
6. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
7. 未使用完的酶标板或者试剂,请于 2-8℃ 保存。辣根过氧化物酶标记抗人 IgG 工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人 IgG 工作液。
8. ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
9. 剩余样品及废弃物应经 121℃ 高压蒸汽灭菌 30 分钟,或用 5.0g/L 次氯suan钠等消毒剂处理 30 分钟后废弃。
10. 人 ELISA 试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
11. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是后加底物溶液及 2N H2SO4。测量时先用此孔调 OD 值至零。
12. 手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置 15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
13. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
14. 没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。
15. 在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。
16. 吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人 ELISA 试剂盒吸取的量不够准确。
17. 吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。
操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l,然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50?l,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50?l,再加入显色剂 B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50?l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
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