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48t/96t 鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作说明书
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48t/96t 鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作说明书

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产品名称:48t/96t 鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作说明书

产品型号:48t/96t

产品厂商:上海古朵生物科技有限公司

简单介绍

鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作说明书由上海古朵生物提供详细介绍!中文名:鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒,别名:鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA kit,规格:48t/96t,用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。

48t/96t 鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作说明书的详细介绍

上海古朵生物提供鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作说明书,价格,规格,用途,特点等详细介绍,本司长期现货供应进口/国产ELISA检测试剂盒,出售不同系列的金标检测试剂盒,白介素试剂盒,染色试剂盒,生化试剂盒,酶联免疫试剂盒,提供免费代测服务,种属有大鼠ELISA试剂盒,小鼠elisa试剂盒,植物ELISA试剂盒,人ELISA试剂盒,狗ELISA试剂盒,鸡ELISA试剂盒,马ELISA试剂盒,牛ELISA试剂盒,兔ELISA试剂盒,更多动物种属请来电联系我司销售人员!

中文名:鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒
供应商:上海古朵
保存:2-8℃
有效期:6个月
检测原理:狗胆囊收缩素(CCK)ELISA试剂盒采用双抗体夹心ABC-ELISA法
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本,例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。
鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒组成

鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒说明:
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。


实验原理:
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。


鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒标本的采集与保存:
1.  血清:
将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:
用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8oC 1000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:
1) 取适量组织块,于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);
2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融 进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复2 次)。
3) 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟,留取上清即可检测。
4. 细胞裂解液:
1)贴壁细胞需要先用胰酶消化,离心收集细胞(悬浮细胞可直接离心收集);
2)将收集到的细胞用冷PBS 洗3 次;
3)物理方法裂解细胞(可先超声破碎细胞,再反复冻融):
i 超声破碎:取适量PBS 重悬细胞,用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂。
ii 反复冻融:将待破碎的细胞在-20 oC 以下冰冻,室温融解,反复3 次,使细胞溶胀破碎。
4)将标本于2-8 oC 1500×g 离心10 分钟,收集上清备用。
5. 细胞培养上清或其它生物标本:
请 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。


鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作说明书操作步骤:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作步骤
鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒注意事项:
1.使用前 TMB 显色液应为无色透明溶液,若发现颜色异常,请及时与厂家联系。
2.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
3. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
4.建议所有标准品、样本都做双份检测。标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活!
6.为免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。
7.禁止混用不同批次试剂盒内的试剂。
8.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
9.为避免酶标板在恒温箱中由于温度的不匀所带来的边缘效应(位于边缘的孔总是反应强 一些),已稀释好的 ABC 和 TMB 显色液在加入酶标板孔前都应预先在 37℃中平衡至少 30 分钟。
10.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
11.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
12.底物请避光保存。
13.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
14.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
15.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。


鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作说明书实验流程:
1.实验前标准品、试剂及样本的准备;
2.加样(标准品及样本)50μL,37℃孵育30分钟;
3.洗板5次,加酶标试剂50ul,37℃孵育半小时;
4.洗板5次;加入显色液A,B各50ul,37℃孵育显色15分钟
5.加终止液50μL,立即450nm读数。
6.计算

特异性:
本试剂盒用于检测鸡骨成型蛋白4(BMP4),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。


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